啮齿动物快速学会恐惧反应,并长久记住。因此,它是用于研究实验室啮齿动物的记忆和恐惧的强大且稳固行为。在恐惧研究中常见的测量反应为凝滞(警惕不动)和惊跳反射。诺达思的恐惧制约系统设置包括使用基于模型(恐惧条件反射和线索恐惧条件反射)的动物运动轨迹追踪系统(EthoVision XT)进行实验的所有组件。
实验通常分为训练和测试两个阶段:
训练阶段:将动物置于特定环境中,先给予一个中性条件刺激(如声音、灯光),紧接着施加一次短暂的足底电击(非条件刺激)。经过多次重复配对后,动物会将原本无害的刺激与疼痛联系起来,形成条件性恐惧记忆。
测试阶段:在训练后的24小时或更长时间后,再次将动物放入相同或改变的环境中,仅给予条件刺激(如声音)或不给予任何刺激,观察其是否表现出僵立行为。
标准操作流程(以小鼠为例)
1.训练阶段(第1天)
将小鼠放入恐惧箱中适应2分钟,记录基线僵立时间。
进行4-6轮“声音+电击”配对训练:
播放30秒声音(条件刺激)
在声音结束前2秒施加2秒电击(非条件刺激)
每轮间隔1-4分钟,总时长约28分钟。
2.测试阶段(第2天)
情境恐惧测试:将小鼠重新放入原训练箱中,不给予声音或电击,观察5分钟内的僵立行为,评估对环境的记忆。
声音恐惧测试:将小鼠置于新环境中(改变形状、气味、光线等),先观察3分钟,再播放30秒声音,继续观察3分钟,评估对声音线索的恐惧记忆。
3.恐惧消退与记忆保持测试(可选)
连续多日重复声音刺激但不给予电击,观察僵立行为是否逐渐减少,评估恐惧记忆的消退能力。
可在第1、3、7天进行保持测试,计算消退保持成绩。