实验动物与分组
研究对象选用216只5周龄断奶Hyla兔(仅选用雌性兔子,以排除性别差异对脂肪代谢的影响),随机分为2组,每组108只。
白天喂养组(DF):早上7:00(日出时间)喂食,全天自由采食;
夜间限制性喂养组(NRF):下午5:00(日落时间)喂食,仅在此时间至次日早上7:00期间可采食。
动物行为学监测
使用红外摄像头全天候记录兔子行为,从每组选取3只兔子进行重点观察,从实验第88天至92天(连续5天)。研究的行为学监测部分采用了诺达思的行为观察记录分析系统(The Observer XT),对以下行为进行编码和记录:
其他监测
除了行为学监测,研究人员使用兽医直肠电子体温计测量直肠温度。除此之外,在兔子14周龄时,每组各取72只兔子,在24小时内每隔4小时,采集血清、肝脏、肌肉和脂肪组织样本。测定包括三碘甲状腺原氨酸和甲状腺素的血清浓度。测量血清中糖皮质激素和瘦素水平,以及总胆固醇。对肝脏组织横向冷冻切片进行中性脂质含量进行检测。测量肝脏甘油三酯、总胆固醇和β-羟基丁酸水平。检测脂肪组织中PPARγ蛋白的表达水平。测量分析肌肉内脂肪比例。另外,检测肝脏、肌肉和脂肪组织中生物钟基因和脂质代谢相关基因的表达水平等。