2.1 实验动物与分组
该研究共使用24只成年雄性大鼠,分为三组,每组8只:
HY组:高打哈欠品系;
LY组:低打哈欠品系;
SD组:未经选育的普通大鼠,作为对照。
雌性刺激鼠的准备:实验中的“诱饵"为雌性SD大鼠,通过人工诱导其进入发情期。
2.2 四臂迷宫测试
研究者自行设计并搭建了一座四臂迷宫,其结构如下:中央区域通过四根直径12cm、长25cm的管道,连接至四个末端方盒(40×30×30cm)。每个方盒与管道之间设有带孔隔板,允许视觉、听觉和嗅觉信号自由传递,但杜绝直接身体接触。
实验时,四个方盒中分别放置:
一只HY雄性
一只LY雄性
一只SD雄性
一个空盒(作为空白对照)
实验当天,一只处于发情期的雌性SD大鼠被放入中央区域,允许其自由探索整个迷宫系统5分钟。雌鼠可以自主选择接近任何一个方盒,而雄鼠则无法主动接触雌鼠,仅能通过隔板进行多感官交流。整个5分钟测试期间,系统持续记录雄性方盒一侧发出的所有50 kHz USVs。
2.3 Noldus行为学工具
这里介绍诺达思为该研究提供的声音行为学分析解决方案:在每个雄性方盒上方7.5cm处,各安装一个频率响应高达150 kHz的专用超声波麦克风,采样率设置为214 kHz,精准捕捉大鼠发出的全部超声频段信号。使用声音行为分析系统(UltraVox XT)进行声音行为分析。声音行为分析系统(UltraVox XT)可以通过捕获完整的声谱,处理和分析啮齿动物的超声波声和其它动物的声音。