在整个实验期间,使用2个月大的雄鼠。在小鼠适应后,随机分配小鼠到治疗组或对照组。治疗组每天接受27天的益生菌混合物(LS + LG),通过使用小鼠灌胃套管进行胃内灌注。对照组则进行胃内灌注0.9% NaCl溶液。经过10天后,将小鼠单独放入观测笼中,观测笼详细情况见下文。在适应观测笼1周后,小鼠接受CMS模型,该模型包括间歇性的声音和光照。自动监测摄食行为,手动测量饮水量,食物、水和2%蔗糖溶液可随意获取。小鼠在不同的时间接受几项行为测试,用于分析运动、焦虑和抑郁样行为,包括旷场、高架十字迷宫、O型迷宫、悬尾试验、强迫游泳实验等测试,并使用EV等软件来自动测量移动距离和花费时间等参数(实验设计如图1)。
观测笼及摄食行为分析
观测笼通过诺达思的鼠类家居行为活动观测箱(PhenoTyper)与食物和饮料摄入监测器以及自动门控制器相结合,用于监测食物摄入量、水和蔗糖摄入量、运动活动和类似焦虑行为。PhenoTyper是一个可配置的仪器类观测系统,其顶部单元包含了一个红外敏感摄像头,3组红外LED灯,以及一个由动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT)控制的音频刺激系统,本实验中PhenoTyper还增加了一个灰色的躲避屋。